產(chǎn)地 | 美國 |
保存條件 | 4° |
品牌 | BD |
貨號 | 555899 |
用途 | 流式細胞術(shù)分析 |
組織來源 | |
細胞形態(tài) | |
是否是腫瘤細胞 | 否 |
CAS編號 | |
保質(zhì)期 | 30天 |
器官來源 | |
免疫類型 | |
品系 | |
生長狀態(tài) | |
物種來源 | |
包裝規(guī)格 | 100 mL |
純度 | % |
是否進口 | 是 |
規(guī)格:100毫升
BD紅細胞裂解液是一種緩沖的濃縮(10X)氯化銨基裂解試劑。當稀釋至1X濃度并按推薦使用時,BD Pharm Lyse™在單克隆抗體染色后裂解紅細胞。當通過流式細胞術(shù)分析時,裂解溶液可導(dǎo)致淋巴細胞和紅細胞碎片的良好光散射分離。BD Pharm Lyse™不含固定劑,因此白細胞在紅細胞裂解后仍然存活。
1X稀釋溶液可在4°C下儲存長達30天。推薦的分析程序
1X裂解液的制備:用蒸餾水1:10稀釋10X濃縮液。1X溶液的pH值應(yīng)在pH 7.1-7.4范圍內(nèi)。如有必要,調(diào)整pH值。使用前將1X溶液加熱至室溫。100ml的10X濃縮物將產(chǎn)生一定量的1X溶液,足以裂解500個樣品。
裂解程序:
注意:以下程序僅適用于人全血紅細胞裂解。由于應(yīng)用各不相同,對于其他樣品,例如小鼠pi臟紅細胞裂解(在37°C下裂解孵育時間長達3分鐘),骨sui紅細胞裂解,每個研究者應(yīng)優(yōu)化條件以獲得 結(jié)果。
1.向每根含有高達200μl全血加單克隆抗體混合物的管中加入2.0ml 1X裂解液。
2.加入裂解液后立即輕輕渦旋每根管。
3.在室溫下孵育,避光,15分鐘。
4.離心機200×g,離心5分鐘。
5.小心地吸出超級乳腺,不要干擾沉淀。
6.加入2.0毫升1X PBS,含有1%熱滅活胎牛血清和0.1%疊氮化鈉(PBS-FBS)。
7.以200×g離心5分鐘。
8.小心地吸出超級乳腺,不要干擾顆粒。
9.將沉淀重懸于0.5ml PBS-FBS或固定劑(例如2%甲醛)中以進行流式細胞術(shù)分析。
故障排除:
不完全裂解可能由于以下幾個原因而發(fā)生:(1)標本的年齡可能影響紅細胞裂解,(2)1X裂解液可能尚未加熱到室溫,或(3)加入裂解液后,樣品可能沒有充分渦旋。如果發(fā)生不完全裂解(通過最終洗滌的細胞懸浮液中存在過量的可見紅細胞來識別),則重復(fù)裂解過程。但是,不建議裂解兩次以上。