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細(xì)胞凋亡是一種正常的生理過程，發(fā)生在胚胎發(fā)育過程中以及維持組織穩(wěn)態(tài)的過程中。凋亡程序的特征在于某些形態(tài)學(xué)特征，包括質(zhì)膜不對稱和附著的喪失，細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核的凝聚以及DNA的核小體間裂解。質(zhì)膜丟失是最早的特征之一。在凋亡細(xì)胞中，膜磷脂磷脂酰絲氨 酸（PS）從質(zhì)膜的內(nèi)小葉轉(zhuǎn)移到外小葉，從而使PS暴露于外部細(xì)胞環(huán)境。膜聯(lián)蛋白V是一種35-36 kDa Ca2 +依賴性磷脂結(jié)合蛋白，對PS具有高親和力，并與暴露PS的細(xì)胞結(jié)合。這種格式保持了其對PS的高親和力，因此可以作為對正在經(jīng)歷凋亡的細(xì)胞進(jìn)行流式細(xì)胞術(shù)分析的靈敏探針。由于PS的外化發(fā)生在細(xì)胞凋亡的早期階段，F(xiàn)ITC膜聯(lián)蛋白V染色可以比基于DN  A 片段化的核變化的測定更早地識別細(xì)胞凋亡。

FITC膜聯(lián)蛋白V染色先于膜完整性的喪失，伴隨凋亡或壞死過程導(dǎo)致的細(xì)胞死亡的 階段。因此，用FITC膜聯(lián)蛋白V染色通常與重要染料如碘化丙啶（PI）或7-氨基放 線菌素（7-AAD）結(jié)合使用，以使研究者能夠識別早期凋亡細(xì)胞（PI陰性，F(xiàn)ITC膜聯(lián)蛋白V陽性）。具有完整膜的活細(xì)胞排除PI，如果死亡和受損細(xì)胞的膜可滲透PI。例如，被認(rèn)為有活力的細(xì)胞是FITC膜聯(lián)蛋白V和PI陰性;處于早期凋亡的細(xì)胞是FITC膜聯(lián)蛋白V陽性和PI陰性;處于晚期凋亡或已經(jīng)死亡的細(xì)胞都是FITC膜聯(lián)蛋白V和PI陽性。該測定不區(qū)分經(jīng)歷過凋亡死亡的細(xì)胞與因壞死途徑而死亡的細(xì)胞，因為在任何一種情況下，死細(xì)胞都會用膜聯(lián)蛋白- FITC和PI染色。然而，當(dāng)隨著時間的推移測量細(xì)胞凋亡時，通?？梢愿櫦?xì)胞從FITC膜聯(lián)蛋白V和PI陰性（存活，或沒有可測量的細(xì)胞凋亡），到FITC膜聯(lián)蛋白V陽性和PI陰性（早期凋亡，膜完整性存在）， 到FITC膜聯(lián)蛋白V和PI陽性（終末期凋亡和死亡）。細(xì)胞通過這三個階段的運動表明細(xì)胞凋亡。相比之下，表明細(xì)胞既是FITC膜聯(lián)蛋白V又是PI陽性的單一觀察本身揭示了有關(guān)細(xì)胞經(jīng)歷死亡過程的信息較少。