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為了準確地進行基因表達量分析，必須滿足只有cDNA作為模板檢出的先決條件，但Total RNA中常?；煊谢蚪MDNA,并可以直接作為PCR反應(yīng)的模板進行擴增，因此會造成解析結(jié)果不準確。為了避免這種情況發(fā)生，通常將檢測用引物設(shè)計在內(nèi)含子前后的外顯子上，使基因組DNA得不到擴增。但是，此方法不適合具有單個外顯子的基因或兩個外顯子之間所跨的內(nèi)含子過小的基因，同時當基因組上有偽基因存在時、或設(shè)計引物對基因組有非特異性擴增時、以及基因信息沒被完全解析的生物種等也同樣不適合于本方法。在這種情況下，我們常常需要對Total RNA樣品進行DNase I處理，以除去殘存的基因組DNA。而DNaseI處理通常要進行復(fù)雜的純化操作，同時會造成RNA的降解和損失。PrimeScript RT reagent Kit with gDNA Eraser是可以除去基因組DNA進行Real Time RT-PCR反應(yīng)的專用反轉(zhuǎn)錄試劑。Kit中使用了具有較強DNA分解活性的gDNA Eraser,通過42℃,2min即可除去基因組DNA。同時由于反轉(zhuǎn)錄試劑中含有抑制DNA分解酶活性的組分，經(jīng)過gDNA Eraser處理后的樣品可以直接進行15 min的反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)合成cDNA,因此，20 min內(nèi)即可迅速完成從基因組DNA去除到CDNA合成的全過程。使用本制品合成的cDNA適用于SYBRsGreen分析法和TaqMan探針分析法，可以根據(jù)實驗?zāi)康?，選擇與SYBRsPremix Ex Taq II(TliRNaseH Plus)、Premix Ex Taq(Probe qPCR)等定量試劑組合使用。注意：Takara Bio使用SYBR& Green I作為研究試劑已得到Molecular Probes Inc.的許可。SYBRa為Molecular ProbesInc.的注冊商標。