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| 產(chǎn)地 | USA |
| 品牌 | GE |
| 貨號 | 17089101 |
| 用途 | 細(xì)胞分離 |
| 包裝規(guī)格 | 1L |
| 是否進口 | 是 |
【名稱】：percol1細(xì)胞分離液
【貨號】：17089101
【品牌】：GE
【保存條件】：RT
【貨期】：現(xiàn)貨
Percol1不連續(xù)密度梯度沉淀法分離純化和淋巴母細(xì)胞
（一） 原理
Percol1是一種包有乙烯吡咯烷酮的硅膠顆粒。滲透壓很低《<20mosm/kgH20)，粘度也很小，可形成高達1.3g/ml密度，采用預(yù)先形成的密度梯度時可在低離心力（200~1000g)于數(shù)分至數(shù)十分鐘內(nèi)達到滿意的細(xì)胞分離結(jié)果。由于Percol1擴散常數(shù)低，所形成的梯度十分穩(wěn)定。此外，Perco11不穿透生物膜，對細(xì)胞無毒害，因此廣泛用于分離細(xì)胞、亞細(xì)胞成分、細(xì)菌，還可將受損細(xì)胞及其碎片與完好的活細(xì)胞分離。
（二）操作方法及注意事項
1.不同濃度（密度）Perco11溶液的制備：先用9份Percol1與1份8.5%NaC1或1.5MPBS混合達到生理性滲透壓，然后用生理溶液(0.85% NaC1或0.15M PBS)稀釋到所需濃度。Percol1濃度(%)705020604030比重g/ml1.0901.0771.0671.0561.0431.031
2.不連續(xù)密度梯度Percol1層的制備：先將試管壁用牛血清濕潤，除去多余血清，這種預(yù)處理可使逐層疊加的Perco11液平穩(wěn)沿管壁流下，使形成滿意的界面。在制備過程中一般用長針頭注射器從高密度向低密度逐層放置，有時相鄰兩層Percol1比重相差不大時，可將Percol1液放入注射器中，小針頭斜面緊貼管壁，任其自然慢慢流下。
3.裝樣：樣品體積和細(xì)胞濃度根據(jù)不同細(xì)胞而異，一般加樣體積不宜過大，細(xì)胞濃度也不可過高，否則會影響細(xì)胞的分離和回收。
4.離心：一般采用離心力為400g，時間20~25min。由于多層Percol1之間密度差別不大，因此離心機加速、降速時要慢，要平穩(wěn)。
5.取樣：當(dāng)所要分離的細(xì)胞絕大部分在兩層的界面時，可逐層去除Percol1液后收集界面部位的細(xì)胞；有時大部分細(xì)胞位于Percol1層中，則需要逐層收集。收獲含有Perco11液的細(xì)胞經(jīng)2次洗滌后可供培養(yǎng)或檢測用。
