支原體檢測(cè)試劑盒
- 發(fā)布日期: 2023-07-25
- 更新日期: 2024-11-12
產(chǎn)品詳請(qǐng)
產(chǎn)地 |
中國(guó)
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品牌 |
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貨號(hào) |
ZQ505-K
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用途 |
科研
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包裝規(guī)格 |
1ml/50T
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是否進(jìn)口 |
否
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一.試劑盒說明
支原體(myc):支原體是一種大小僅為0.2~0.3 um,無(wú)細(xì)胞壁,可透過一般過濾膜(0.22-0.45 um)的原核生物,在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,發(fā)生率達(dá)到63%,因而細(xì)胞培養(yǎng)過程中被支原體污染是一個(gè)世界性的難題。當(dāng)細(xì)胞(特別是傳代細(xì)胞)被支原體污染后,細(xì)胞內(nèi)的DNA、RNA及蛋白表達(dá)發(fā)生改變,而細(xì)胞的生長(zhǎng)率一般并未發(fā)生顯著的影響,因而細(xì)胞被支原體污染一般難以察覺。因此細(xì)胞都需要定期(如每個(gè)月)進(jìn)行支原體污染的檢測(cè)。檢測(cè)支原體的方法包括肉湯或培養(yǎng)、 ELISA、直接或間接的熒光染色、PCR法等,其中, PCR法靈敏度最高(可檢測(cè)10個(gè)拷貝DNA)。本試劑盒能檢測(cè)支原體種類包括 M.等多種常見支原體,在細(xì)胞污染中這些種支原體占到99%以上的比例。本產(chǎn)品克服了PCR反應(yīng)配置過程中的繁瑣程序,通過加入抑制非特異性結(jié)合的,有效的整合了所有PCR反應(yīng)成分,實(shí)現(xiàn)了一步法PCR技術(shù)新的突破
三. 操作步驟
反應(yīng)體系: Myco-PCR-Mix 18ul
待檢測(cè)細(xì)胞上清液 2ul
按照以上反應(yīng)比例,在PCR管中將待檢測(cè)樣品上清液 2ul加入到18ul Myco-PCR-Mix中,每次檢測(cè)請(qǐng)用Positiv模版作為陽(yáng)性對(duì)照,用Negative 模版作為陰性對(duì)照。PCR反應(yīng)程序?yàn)椋?5℃ 5min,(95℃ 30s,55℃ 45s,72℃ 45s)36 個(gè)循環(huán),72℃ 5min, 10℃ 保存。PCR產(chǎn)物跑1.5 % 膠,用DL2000的DNA Marker顯示片段大小。待檢測(cè)樣品中如果出現(xiàn)與陽(yáng)性對(duì)照大小一致(450-600 bp)的條帶,說明樣品被。
產(chǎn)品僅供使用說明:僅供科研使用。
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